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BD培養(yǎng)基的配制講訴
更新時(shí)間:2014-12-29 | 點(diǎn)擊率:3125
BD培養(yǎng)基
(Medium)是供微生物
、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料
,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)
、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等
。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定
。
BD培養(yǎng)基
的配制
1.配料
配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水
,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》
。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀
加熱溶解
,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸
,瓊脂的熔解溫度95~97℃
,且需要邊
加熱邊攪拌以防止燒焦。
3.調(diào)PH
用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值
。
4.過(guò)濾
濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾
。
5.分裝
一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
(1)三角瓶
若作靜置培養(yǎng)
,則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶
,zui多不能超過(guò)150 ml培養(yǎng)基/250 ml的
三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞
,造成染菌
;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250
ml的三角瓶
,保證通氣良好
。
(2)試管分裝
液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;
固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml
,約試管的1/5高度
。
6.包扎
分裝好后,塞上棉塞
,在用牛皮紙將棉塞包裹好
,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。
7.滅菌
按配方上要求的溫度
、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌
。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞
,培養(yǎng)
基中的糖
、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。
8.擺斜面
滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放
,使其凝固成為一個(gè)斜面
,約占試管長(zhǎng)度的1/2。
9.貯存
培養(yǎng)基在30℃下放置一天
,無(wú)污染的即可使用
。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
上一篇:
*BD培養(yǎng)基
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培養(yǎng)基的類型及選擇
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